细胞名称SNU-1（人胃癌细胞） 

种属人 

年龄（性别）男；44岁 

组织来源胃癌，腹水

生长特性  贴壁

细胞形态上皮细胞样 

背景描述SNU-1细胞是由J·Park与其同事在1984年从细胞毒性治疗前取出的低分化原位胃癌中建立的细胞株。SNU-1细胞L-多巴脱羧酶(DDC)表达阴性、VIP受体表达阳性，但胃受体缺失。没有注意到SNU-1细胞存在N-myc、L-myc、myb和EGF受体基因的扩增或重排的证据。SNU-1细胞表达的c-myc和c-erb-B-2 RNA水平与其它细胞株相当。以下基因在SNU-1细胞中不表达：N-myc、L-myc、c-cis、IGF-2及胃泌素释放肽。 

生长培养基RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%温度：37℃

　　验收细胞注意事项

　　1、收到小鼠肺上皮细胞MLE-12，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快联系。

　　2、收到小鼠肺上皮细胞MLE-12，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理。

　　3、收到小鼠肺上皮细胞MLE-12后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清。刚接到细胞，若细胞不多时血清浓度可以加到15％去培养。若细胞迏到80%左右，血清浓度还是在10％。

　　4、收到小鼠肺上皮细胞MLE-12时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养基吸出，留下5-10ML培养基继续培养：超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心3分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

　　5、将培养瓶置于37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于4℃冰箱，以备不时之需。

　　6、24小时后，小鼠肺上皮细胞MLE-12恢复并贴满瓶壁，即可传代。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS或Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml0.25%含EDTA的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般1-3分钟，不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之完全脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。

　　7、贴壁细胞，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液，37℃，5%CO2培养。